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染色质免疫共沉淀
染色质免疫共沉淀(ChIP-PCR&Sequence)

染色质免疫沉淀技术与PCR技术结合,检测活体细胞状态下与特异蛋白结合的DINA片段。将活体细胞中的蛋白一染色质复合物分离,超卢波随机剪切染色质。利用蛋白A凝胶纯化蛋白质特异抗体-蛋白-染色质复合物,纯化物经解离获得蛋白结合的(片段化的)染色质。特异引物扩增鉴定共沉淀的DNA片段或对共沉淀的所有DNA进行测序。

染色质免疫沉淀技术应用

染色质免疫共沉淀技术用于分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转最因子)的靶基因有那些。ChIP-PCR技术主要应用于验证及探寻体内环境中。蛋白质和DNA的直接相互作用,旨在探索特定蛋白质在DNA上的特定结合序列(与SIP实验相结合,可以确定待定结合位点)。ChIP-Seg 技术用于筛选与目的蛋白结合的DNA,常在研究转录调控以及组蛋白修饰中被应用到。


流程
1、(可选)细胞培养与处理2、交联与超声破碎
3、抗体孵育及蛋白A孵育
4、洗涤、洗脱与解胶联
5、DINA 纯化与回收
6、(定量) PaR
7、数据分析

客户需提供
1.特检基因名称或ID (或由我公司预测〉
2、100u培养皿细胞一 皿(ChIP-PGR 带培养液。)或两皿(ChIP-Seg, 带培养液)
3、ChIP级或IHC级蛋白单抗及无关单抗

客户得到的结果
1、PCR引物序列(定性分析扩增不超过400bp,定量分析扩增200bp 左右。
2、电泳胶图(定性分析情况下)
3.定量POR曲线图(定量分析情况下:包括PCR产物测序结果)4、结果简析